1. Apa itu kultur sel?
Kultur sel mengacu pada pemindahan sel dari hewan atau tumbuhan dan kemudian menumbuhkannya di lingkungan buatan yang menguntungkan.Sel-sel dapat diambil langsung dari jaringan dan dipecah dengan cara enzimatik atau mekanis sebelum dikultur, atau dapat diturunkan dari garis sel atau garis sel yang sudah ada.
2. Apa yang dimaksud dengan budaya primer?
Kultur primer mengacu pada tahap kultur setelah sel dipisahkan dari jaringan dan berkembang biak dalam kondisi yang sesuai sampai mereka menempati semua substrat yang tersedia (yaitu, mencapai pertemuan).Pada tahap ini, sel harus disubkultur dengan memindahkannya ke wadah baru dengan media pertumbuhan segar untuk memberikan lebih banyak ruang untuk pertumbuhan lanjutan.
2.1 Garis sel
Setelah subkultur pertama, kultur primer disebut cell line atau subclone.Garis sel yang berasal dari kultur primer memiliki umur yang terbatas (yaitu terbatas; lihat di bawah), dan saat mereka lewat, sel dengan kapasitas pertumbuhan tertinggi mendominasi, menghasilkan tingkat genotipe tertentu dalam populasi yang konsisten dengan fenotipe.
2.2 Strain sel
Jika subpopulasi dari garis sel dipilih secara positif dari kultur dengan kloning atau metode lain, garis sel akan menjadi galur sel.Strain sel biasanya memperoleh perubahan genetik tambahan setelah garis induk dimulai.
3. Garis sel terbatas dan berkesinambungan
Sel normal biasanya membelah hanya beberapa kali sebelum kehilangan kemampuan untuk berkembang biak.Ini adalah peristiwa yang ditentukan secara genetis yang disebut penuaan;garis sel ini disebut garis sel terbatas.Namun, beberapa garis sel menjadi abadi melalui proses yang disebut transformasi, yang dapat terjadi secara spontan atau dapat diinduksi oleh bahan kimia atau virus.Ketika garis sel yang terbatas mengalami transformasi dan memperoleh kemampuan untuk membelah tanpa batas, itu menjadi garis sel yang berkelanjutan.
4. Kondisi budaya
Kondisi kultur setiap jenis sel sangat berbeda, tetapi lingkungan buatan untuk sel kultur selalu terdiri dari wadah yang sesuai, yang berisi hal-hal berikut:
4.1 Substrat atau media biakan yang menyediakan nutrisi penting (asam amino, karbohidrat, vitamin, mineral)
4.2 Faktor pertumbuhan
4.3 Hormon
4.4 Gas (O2, CO2)
4.5 Lingkungan fisik dan kimia yang diatur (pH, tekanan osmotik, suhu)
Sebagian besar sel bergantung pada penjangkaran dan harus dibiakkan pada substrat padat atau semi-padat (kultur melekat atau monolayer), sementara sel lain dapat tumbuh mengambang di media (kultur suspensi).
5.Kriopreservasi
Jika terdapat kelebihan sel dalam subkultur, sel tersebut harus diperlakukan dengan zat pelindung yang sesuai (seperti DMSO atau gliserol) dan disimpan pada suhu di bawah -130°C (kriopreservasi) sampai dibutuhkan.Untuk informasi lebih lanjut tentang subkultur dan kriopreservasi sel.
6.Morfologi sel dalam kultur
Sel dalam kultur dapat dibagi menjadi tiga kategori dasar berdasarkan bentuk dan penampilannya (yaitu morfologi).
6.1 Sel fibroblas bersifat bipolar atau multipolar, berbentuk memanjang, dan tumbuh melekat pada substrat.
6.2 Sel mirip epitel berbentuk poligonal, memiliki ukuran lebih teratur, dan melekat pada matriks dalam lembaran diskrit.
6.3 Sel mirip limfoblas berbentuk bulat dan biasanya tumbuh dalam suspensi tanpa menempel ke permukaan.
7.Aplikasi kultur sel
Kultur sel adalah salah satu alat utama yang digunakan dalam biologi sel dan molekuler.Ini memberikan sistem model yang sangat baik untuk mempelajari fisiologi normal dan biokimia sel (seperti penelitian metabolisme, penuaan), efek obat-obatan dan senyawa beracun pada sel, dan efek mutagenesis dan karsinogenik.Ini juga digunakan untuk skrining dan pengembangan obat dan pembuatan senyawa biologis skala besar (seperti vaksin, protein terapeutik).Keuntungan utama menggunakan kultur sel untuk semua aplikasi ini adalah konsistensi dan reproduktifitas hasil yang dapat diperoleh dengan menggunakan kumpulan sel hasil kloning.
Waktu posting: Jun-03-2019