1.Memilih garis sel yang tepat
Saat memilih garis sel yang sesuai untuk eksperimen Anda, harap pertimbangkan kriteria berikut:
a.Spesies: Garis sel non-manusia dan non-primata biasanya memiliki batasan keamanan biologis yang lebih sedikit, tetapi pada akhirnya percobaan Anda akan menentukan apakah akan menggunakan biakan dari spesies tertentu.
b.Fitur: Apa tujuan percobaan Anda?Misalnya, garis sel yang berasal dari hati dan ginjal mungkin lebih cocok untuk pengujian toksisitas.
c.Terbatas atau berkelanjutan: Meskipun memilih dari garis sel yang terbatas dapat memberi Anda lebih banyak pilihan untuk mengekspresikan fungsi yang benar, garis sel yang berkelanjutan umumnya lebih mudah untuk dikloning dan dipelihara.
d.Normal atau berubah: Garis sel yang berubah biasanya memiliki tingkat pertumbuhan yang lebih tinggi dan efisiensi penyemaian yang lebih tinggi, berkelanjutan, dan membutuhkan lebih sedikit serum dalam media kultur, tetapi fenotipe mereka telah mengalami perubahan permanen melalui transformasi genetik.
e.Kondisi dan karakteristik pertumbuhan: Apa persyaratan Anda untuk kecepatan pertumbuhan, kepadatan saturasi, efisiensi kloning, dan kemampuan pertumbuhan suspensi?Misalnya, untuk mengekspresikan protein rekombinan dengan hasil tinggi, Anda mungkin perlu memilih galur sel yang memiliki laju pertumbuhan cepat dan kemampuan tumbuh dalam suspensi.
f.Kriteria lain: Jika Anda menggunakan cell line yang terbatas, apakah stok yang tersedia cukup?Apakah garis sel sepenuhnya dicirikan, atau Anda harus memverifikasinya sendiri?Jika Anda menggunakan garis sel abnormal, apakah ada garis sel normal setara yang dapat digunakan sebagai kontrol?Apakah garis sel stabil?Jika tidak, seberapa mudah mengkloningnya dan menghasilkan stok beku yang cukup untuk eksperimen Anda?
2. Dapatkan garis sel
Anda dapat membangun biakan Anda sendiri dari sel primer, atau Anda dapat memilih untuk membeli biakan sel yang sudah ada dari pemasok komersial atau nirlaba (yaitu bank sel).Pemasok terkemuka menyediakan lini sel berkualitas tinggi yang telah diuji integritasnya dengan cermat dan memastikan bahwa biakan bebas dari kontaminan.Kami merekomendasikan untuk tidak meminjam biakan dari laboratorium lain karena memiliki risiko tinggi kontaminasi biakan sel.Terlepas dari sumbernya, harap pastikan semua lini sel baru telah diuji untuk kontaminasi mikoplasma sebelum Anda mulai menggunakannya.
Waktu posting: Feb-01-2023